单克隆抗体是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交瘤细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的,所以它的免疫球蛋白属同一类型,质地纯一,而且它是针对某一抗原决定簇的,因此特异性强,亲和性也一致。1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。
服务优势:
★技术平台:细胞融合与杂交瘤筛选技术;
★可提供多肽设计服务,帮助你设计适于生产抗体进行后续实验的多肽;
★可供选择的附加服务有组织/细胞天然抗原的Western Blot检测。
★ 经多次克隆化保证细胞为单克隆,且连续两次克隆化所检测亚克隆的阳性率为100%;
★ 选取1~2个最好的克隆,生产腹水,并可根据客户要求进行抗体纯化。
服务流程:
1.免疫和ELISA检测:客户提供的蛋白质或多肽与载体蛋白(如KLH)偶联。需要约4mg蛋白质免疫原或5~10mg的多肽,免疫5只Balb/c小鼠,采血用ELISA进行检测;
2.融合和筛选:用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,得到的杂交瘤细胞通过增值和ELISA筛选得到高效价的克隆;
3.亚克隆和交付的结果:挑选两个最好的克隆进行亚克隆和亚型鉴定,交付结果包括每个克隆一瓶细胞培养液和5ml培养上清。
客户提供:
提供符合技术要求数量足够的抗原,3~4mg蛋白(SDS-PAGE纯度大于90%),或两种不同交联的多肽各2~3mg(要求纯度大于90%)。
我司提供:
2个单克隆细胞株及10ml腹水/每个细胞株。
抗体制备——单克隆抗体制备
作者:广州莱德尔生物科技有限公司 2013-09-26T16:04 (访问量:2011)
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