精品│翌圣ZymeEditor打造超高文库转化率T4 DNA Ligase
建库作为NGS测序的核心步骤，直接影响测序质量，文库转化率是评估文库质量的重要指标，高的文库转化率一定程度上意味着文库丰富度、测序数据均一性更好。常规T4 DNA Ligase催化DNA的 3’-OH 和接头的5’-磷酸基团之间形成磷酸二酯键完成接头连接，但此过程中会出现片段自连，从而减低文库转化率，影响文库丰富度与测序质量。翌圣ZymeEditor™酶改造平台对T4 DNA Ligase进行定向改造获得Hieff® 5' App T4 DNA Ligase（Cat#14960ES），该突变体只能以预苷化接头为底物进行接头连接，显著减少片段自连，提高文库转化率。
图1. NGS常规建库流程
产品特点
1、极低片段自连：只能以预腺苷化的接头为底物，极大降低片段自连。
2、超高接头连接效率：连接效率达95%以上。
3、严格质控：无切口酶、外切酶及RNase残留。
数据展示
图2. 以170 bp模式片段为底物连接效率检测
图3. 以300 bp模式片段为底物连接效率检测
图4. RNase残留检测 C：阴性对照
3、无切口酶及外切酶残留
将200 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无切口酶残留。
图5. 切口酶残留检测 C：阴性对照
将2000 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无外切酶残留。
图6. 外切酶残留检测 C：阴性对照
相关产品推荐
|
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
|
末修加A |
UCF.ME® T4 DNA Polymerase (3 U/μL) |
14457ES |
|
T4 Polynucleotide kinase(10 U/μL) |
12902ES |
|
|
常规接头连接 |
Hieff® Quick T4 DNA Ligase |
10301ES |
|
预腺苷化接头连接 |
Hieff® 5' App T4 DNA ligase |
14960ES |
|
文库扩增 |
地 址： 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元 联系人： 李自转 电 话： 400-6111-883、021-34615995-8075 传 真： 021-34615995-188 Email：lizizhuan@yeasen.com
普通PCR产品选购指南
(2024-11-28T00:00 浏览数:10874)
RNaseA和DNase I ，核酸提取好伴侣
(2024-11-28T00:00 浏览数:10762)
一文教你了解和选择蛋白酶K
(2024-11-28T00:00 浏览数:9173)
恒温扩增技术，引领分子诊断POCT新方向
(2024-11-28T00:00 浏览数:6526)
一文教你如何使用基因转染增强剂-聚凝胺(Polybrene)来提高转染效率
(2024-11-28T00:00 浏览数:6357)
胰蛋白酶（胰酶）有哪几种？重组还是非重组？胰蛋白酶如何选择？
(2024-11-27T00:00 浏览数:11188)
重组人血清白蛋白
(2024-11-27T00:00 浏览数:10934)
常用限制性内切酶选择指南（含酶切位点、同裂酶、甲基化）
(2024-11-27T00:00 浏览数:10869)
NNMTi（烟酰胺N-甲基转移酶抑制剂）研究
(2024-11-27T00:00 浏览数:8796)
IVD RDC，促进IVD企业产品快速上市
(2024-11-27T00:00 浏览数:10818) |