如何修炼成流式高手 -方案设计(上)-技术前沿-资讯-生物在线

如何修炼成流式高手 -方案设计(上)

作者:贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 2020-08-27T15:38 (访问量:2242)

 
我们时常会遇到,明明染色Marker都来自一篇文献,但是最后实验结果却变成“买家秀与卖家秀”。
 
 
产生这种现象的原因是什么?以及我们为什么要如何优化我们的染色方案呢?我们先看具体的例子。
 
 
方案1与方案2,所选择的marker都完全一致,所选用的荧光素种类一样,但是搭配不一样。那么我们看看同一个样本,最后各个细胞亚群的结果一样吗?
 
 
方案1与方案2,CD4+CD25+ 的百分比接近(A与C比较),可是CD8+CD69+的百分比却相差很多(C与D比较)。
 
 
造成这种原因其实就是我们平时说到到spreading现象。
 
 
Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.
 
 
如果要优化流式染色方案中,由spreading现象产生的分辨率降低,我们可以使用SWOFF方法。通过如下流程,就可以很快找出究竟是由于那个通道的配色不合理,导致分辨能力下降。
 
 
 
在不同的检测平台,元件的光电转化效率会直接影响仪器总体分辨率。
 
 
不仅如此,科技的进步带来的还有更小的spreading现象,这使得配色也更加的轻松,结果也更加的准确。
 
 
你想知道如何检查自己的染色方案么?利用SWOFF的方法,可以帮您发现并且优化,使检测更加准确。点击下方阅读全文,获取SWOFF的详细步骤。
 
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